一、轉(zhuǎn)染的途徑大致可分為物理介導(dǎo)、化學(xué)介導(dǎo)和生物介導(dǎo)三類：

1.物理介導(dǎo)：電穿孔法、顯微注射和基因槍屬于通過物理方法將基因?qū)爰毎姆独?/p>

2.化學(xué)介導(dǎo)：方法很多，如經(jīng)典的磷酸鈣共沉淀法、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法、和多種陽離子物質(zhì)介導(dǎo)的技術(shù)。

3.生物介導(dǎo)：方法有較為原始的原生質(zhì)體轉(zhuǎn)染，和現(xiàn)在比較多見的各種病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染技術(shù)。

理想細胞轉(zhuǎn)染方法，應(yīng)該具有轉(zhuǎn)染效率高、細胞毒性小等優(yōu)點。病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染技術(shù)，是目前轉(zhuǎn)染效率zui高的方法，同時具有細胞毒性很低的優(yōu)勢。但是，病毒轉(zhuǎn)染方法的準備程序復(fù)雜，常常對細胞類型有很強的選擇性，在一般實驗室中很難普及。其它物理和化學(xué)介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染方法，則各有其特點。

需要指出的一點，無論采用哪種轉(zhuǎn)染技術(shù)，要獲得*的轉(zhuǎn)染結(jié)果，可能都需要對轉(zhuǎn)染條件進行優(yōu)化。影響轉(zhuǎn)染效率的因素很多，從細胞類型、細胞培養(yǎng)條件和細胞生長狀態(tài)，到轉(zhuǎn)染方法的操作細節(jié)，都需要考慮。

二、常規(guī)轉(zhuǎn)染技術(shù)：

1.瞬時轉(zhuǎn)染（transient transfection）：外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中，因此一個宿主細胞中可存在多個拷貝數(shù)，產(chǎn)生高水平表達，但通常只持續(xù)幾天，多用于啟動子和其他調(diào)控元件的分析。一般來說，超螺旋質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染效率較高，在轉(zhuǎn)染后24~72h小時內(nèi)（依賴于各種不同的構(gòu)建）分析結(jié)果，常常用到一些報告系統(tǒng)和熒光蛋白，β半乳糖苷酶等來幫助檢測。

2.穩(wěn)定轉(zhuǎn)染（Stable transfected）：外源DNA既可以整合到宿主細胞中，也可能作為一種游離體（episome）存在。盡管線性DNA比超螺旋DNA轉(zhuǎn)入量低但整合率高。外源DNA整合到染色體中概率很小，大約1/104轉(zhuǎn)染細胞能整合，通常需要通過一些選擇性標(biāo)記。如來氨丙基轉(zhuǎn)移酶（APH；新霉素抗性基因），潮霉素磷酸轉(zhuǎn)移酶（HPH），胸苷激酶（TK）等反復(fù)篩選，得到穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的同源細胞系。

瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的比較

三、轉(zhuǎn)染方式

細胞由帶負電荷的磷脂雙分子層構(gòu)成，這對大分子物質(zhì)來說是個不可透過的屏障，比如DNA和RNA的磷酸骨架，其也帶負電荷。為了使核酸穿過細胞膜，研究人員開發(fā)了多種技術(shù)，大致分為三類：化學(xué)方法---利用載體分子包被核酸使其呈現(xiàn)中性電荷或正電荷。生物方法---利用基因工程病毒轉(zhuǎn)染非病毒基因到細胞中。物理方法---在細胞膜表面產(chǎn)生一個瞬時的孔從而導(dǎo)入DNA。然而，沒有一種方法適用于所有的細胞和實驗，理想的方法應(yīng)根據(jù)您的細胞類型和實驗需要進行選擇，理想的方法應(yīng)具有高轉(zhuǎn)染效率，低細胞毒性和對正常生理學(xué)的影響最小，并且易于使用和可重復(fù)性等特點。