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T載體的作用以及克隆時(shí)為什么要用T載體？

T載體又叫T質(zhì)粒載體，是指T4噬菌體DNA連接酶，作用是在有Mg2、ATP存在的連接緩沖系統(tǒng)中，將分別經(jīng)酶切的zd載體分子與外源DNA分子進(jìn)行連接。DNA連接酶有兩種：T4噬菌體DNA連接酶和大腸桿菌DNA連接酶。兩種DNA連接酶都有將兩個(gè)帶有相同粘性末端的DNA分子連在一起的功能，而且T4噬菌體DNA連接酶還有一種大腸桿菌DNA連接酶沒有的特性，即能使兩個(gè)平末端的雙鏈DNA分子連接起來。T4噬菌體DNA連接酶催化DNA連接反應(yīng)內(nèi)分為3步：首先，T4DNA連接酶與輔因子ATP...

安諾倫代理BioGems 品牌產(chǎn)品——流式細(xì)胞術(shù)產(chǎn)品

peprotech(派普泰克)公司創(chuàng)立于1988年，總部位于美國(guó)新澤西洲。peprotech公司始終致力于為生命科學(xué)研究和細(xì)胞治療市場(chǎng)提供高品質(zhì)的細(xì)胞因子產(chǎn)品。經(jīng)過20多年的發(fā)展，peprotech公司已成為能提供多種高質(zhì)量細(xì)胞因子和重組蛋白，相應(yīng)的單克隆、多克隆和生物素標(biāo)記抗體，以及elisa試劑盒的世界。2010年，peprotech公司在江蘇省蘇州市設(shè)立其在中國(guó)的常駐代表機(jī)構(gòu)，負(fù)責(zé)對(duì)其產(chǎn)品進(jìn)行技術(shù)支持和市場(chǎng)推廣。2014年peprotech公司推出自己的流式細(xì)胞術(shù)產(chǎn)品品...

噬菌體展示系列之抗體親和力成熟

近年來，隨著抗體藥物的廣泛上市，抗體已經(jīng)取代基因治療成為生物制藥領(lǐng)域的主要生力軍。而抗體在疾病診斷、治療和預(yù)防方面的作用很大程度上取決于其親和力的高低，隨著抗體工程技術(shù)的不斷發(fā)展，如何提高抗體親和力已成為抗體工程的難題之一。圍繞這一問題人們已經(jīng)從不同的角度展開了研究，例如，提高抗體庫(kù)的質(zhì)量、增加抗體庫(kù)的多樣性、進(jìn)行抗體重鏈或輕鏈的替換以及點(diǎn)突變有目的進(jìn)行氨基酸替換等都能不同程度地提高抗體親和力。抗體親和力表示抗體與抗原結(jié)合能力的大小。抗體親和力成熟是指機(jī)體正常存在的一種免疫功...

轉(zhuǎn)染、轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)你還在傻傻分不清？

一、什么是轉(zhuǎn)染?轉(zhuǎn)染(transfection)是真核細(xì)胞主動(dòng)或被動(dòng)導(dǎo)入外源DNA片段而獲得新的表型的過程。常規(guī)轉(zhuǎn)染技術(shù)可分為兩大類，一類是瞬時(shí)轉(zhuǎn)染，一類是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染（永jiu轉(zhuǎn)染）。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中，因此一個(gè)宿主細(xì)胞中可存在多個(gè)拷貝數(shù)，產(chǎn)生高水平的表達(dá)，但通常只持續(xù)幾天，多用于啟動(dòng)子和其它調(diào)控元件的分析。一般來說，超螺旋質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染效率較高，在轉(zhuǎn)染后24-72小時(shí)內(nèi)（依賴于各種不同的構(gòu)建）分析結(jié)果，常常用到一些報(bào)告系統(tǒng)如熒光蛋白，β半乳糖苷酶等來幫...

【行業(yè)動(dòng)態(tài)】CAR-T細(xì)胞療法最新研究進(jìn)展！

CAR-T(ChimericAntigenReceptorT-CellImmunotherapy)，即嵌合抗原受體T細(xì)胞免疫療法。該療法是一種出現(xiàn)了很多年但近幾年才被改良使用到臨床中的新型細(xì)胞療法。在急性白血病和非霍奇金淋巴瘤的治療上有著顯著的療效，被認(rèn)為是最有前景的腫瘤治療方式之一。正如所有的技術(shù)一樣，CAR-T技術(shù)也經(jīng)歷一個(gè)漫長(zhǎng)的演化過程，正是在這一系列的演化過程中，CAR-T技術(shù)逐漸走向成熟這種新的治療策略的關(guān)鍵之處在于識(shí)別靶細(xì)胞的被稱作嵌合抗原受體（chimerica...

安諾倫代理ACRO品牌產(chǎn)品——優(yōu)質(zhì)蛋白供應(yīng)商

ACROBiosystems公司是一個(gè)具有全球范圍影響力的生物技術(shù)lingdao品牌，其運(yùn)營(yíng)包擴(kuò)了位于北美、歐洲和亞洲的數(shù)家公司，主要為生命科學(xué)研究、生物制藥與疫病診斷等行業(yè)提供產(chǎn)品、技術(shù)服務(wù)和臨床應(yīng)用等解決方案，同時(shí)致力于在蛋白組學(xué)、藥物發(fā)現(xiàn)和細(xì)胞治療等領(lǐng)域推廣面向工業(yè)化和臨床轉(zhuǎn)化的技術(shù)和產(chǎn)品。ACROBiosystems的業(yè)務(wù)遍及全球60多個(gè)國(guó)家和地區(qū)，并通過在中國(guó)、英國(guó)等世界范圍的不同時(shí)區(qū)設(shè)立分支機(jī)構(gòu)以服務(wù)于當(dāng)?shù)乜蛻襞c經(jīng)銷商。ACROBiosystems中國(guó)公司成立于2...

多克隆抗體是由多個(gè)抗原決定簇組成的

多克隆抗體通常是由多個(gè)抗原決定簇組成的，由一種抗原決定簇刺激機(jī)體，由一個(gè)B淋巴細(xì)胞接受該抗原刺激所產(chǎn)生的抗體稱之為單克隆抗體（MonoclonalAntibody）。由多種抗原決定簇刺激機(jī)體，相應(yīng)地就產(chǎn)生各種各樣的單克隆抗體，這些單克隆抗體混雜在一起就是多克隆抗體，機(jī)體內(nèi)所產(chǎn)生的抗體就是多克隆抗體；除了抗原決定簇的多樣性以外，同樣一種抗原決定簇，也可刺激機(jī)體產(chǎn)生IgG、IgM、IgA、IgE和IgD等五類抗體?？乖碳C(jī)體，產(chǎn)生免疫學(xué)反應(yīng)，由機(jī)體的漿細(xì)胞合成并分泌的與抗原有特...

噬菌體的分離與純化

實(shí)驗(yàn)原理噬菌體感染宿主細(xì)胞后，其DNA(或RNA)在細(xì)胞體內(nèi)進(jìn)行復(fù)制、轉(zhuǎn)錄，相關(guān)基因表達(dá)，裝配成完整的噬菌體顆粒，最后裂解宿主細(xì)胞或通過擠出方式從宿主細(xì)胞(宿主細(xì)胞不被殺死，如M1噬菌體)中釋放出來。因此，①在液體培養(yǎng)基中可使渾濁的菌懸液變?yōu)榍辶粱蜉^清亮。利用噬菌體的這種特性，在樣品中加入敏感菌株與液體培養(yǎng)基混合后培養(yǎng)，噬菌體便能大量增殖，釋放，從而可分離到特定的噬菌體。②在有宿主細(xì)菌生長(zhǎng)的軟瓊脂平板上，噬菌體可裂解細(xì)菌或限制被染細(xì)菌的生長(zhǎng)，形成透明的或渾濁的空斑，亦稱噬菌斑...